Autor: Milicevic, D.; Hlaváč, J.
Název práce v češtině: Nová fluorescenční sonda na bázi peptidů pro současné snímání chymotrypsinu a peroxidu vodíku
Název práce v angličtině: Novel Peptide-Based Fluorescent Probe for Simultaneous Sensing of Chymotrypsin and Hydrogen Peroxide
Studentská publikace: ne
Klíčová slova v češtině: aktivita proteasy; H2O2; pH; apoptosa; buňky; plíce
Klíčová slova v angličtině: protease activity; H2O2; pH; apoptosis; cells; lung
Abstrakt česky: Vyvinutá multifunkční fluorescenční sonda umožňuje současnou detekci chymotrypsinu jako modelové proteázy a peroxidu vodíku jako zástupce reaktivních forem kyslíku (ROS) v biologicky relevantních koncentračních rozmezích. Snímání chymotrypsinu je založeno na štěpení jeho selektivně rozpoznatelné peptidové sekvence a následném narušení FRET mezi kumarinem (DEAC) a fluoresceinem (FL). Analogicky přítomnost peroxidu vodíku způsobuje postupnou degradaci H2O2-labilního benzopyrylium-kumarinového barviva (BC). Vezmeme-li v úvahu odezvy fluorescenční emise jednotlivých fluoroforů připojených k chymotrypsin-peroxidové sondě po jejich excitaci při 425 nm, mohla by být ve vzorku pouze přítomnost chymotrypsinu (50-1000 ng/ml) nebo peroxidu vodíku (10-200 uM). jednoznačně potvrzena nebo vyvrácena. Kromě toho bylo možné provést spolehlivou současnou detekci a přibližnou kvantifikaci obou studovaných druhů v koncentračních rozmezích 100-1000 ng/mL a 20-200 uM pro chymotrypsin a H2O2. Získané výsledky jsou shrnuty a vizualizovány v grafických modelech.
Abstrakt anglicky: The developed multifunctional fluorescent probe enables the simultaneous detection of chymotrypsin as a model protease and hydrogen peroxide as a representative of reactive oxygen species (ROS) in biologically relevant concentration ranges. The chymotrypsin sensing is based on the cleavage of its selectively recognizable peptide sequence and the consequent disruption of FRET between coumarin (DEAC) and fluorescein (FL). Analogously, the presence of hydrogen peroxide causes the gradual degradation of the H2O2-labile benzopyrylium-coumarin (BC) dye. Considering the fluorescence emission responses of individual chymotrypsin-peroxide probe-attached fluorophores after their excitation at 425 nm, the sole presence of either chymotrypsin (50-1000 ng/mL) or hydrogen peroxide (10-200 mu M) in a sample could be unambiguously confirmed or refuted. In addition, reliable simultaneous detection and approximate quantification of both studied species in the concentration ranges of 100-1000 ng/mL and 20-200 mu M for chymotrypsin and H2O2, respectively, could be performed as well. The obtained results are summarized and visualized in the graphical models.
Jazyk v originále: Angličtina
Název časopisu: ACS Omega
Rok: 2024
Svazek (ročník): 9
Číslo časopisu v rámci uvedeného svazku: 15
Strana od-do: 17481−17490
Impact factor: 3.7
Q1: ne

ISSN časopisu: 2470-1343
Vydavatel: American Chemical Society
Způsob financování: Palacky University Olomouc
DOI: 10.1021/acsomega.4c00303