Autor: Miličevič, D.; Hlaváč, J.
Název práce v češtině: Multiúčelová sonda s trojitým FRET pro detekci tří proteáz
Název práce v angličtině: Triple-FRET multi-purpose fluorescent probe for three-protease detection
Studentská publikace: ne
Klíčová slova v češtině: Rezonance, Proteázy, Extrakty
Klíčová slova v angličtině: Resonance; Proteases, Extracts
Abstrakt česky: Byla vyvinuta a ověřena nová, robustní a spolehlivá metodika pro tříproteázový screening v jednoenzymovém režimu, využívající víceúčelovou peptidovou sondu se třemi selektivně štěpitelnými místy vybavenými čtyřmi fluorofory. Koncept jedné excitace se čtyřmi emisemi založený na trojitém FRET pro jednoznačné snímání trypsinu, chymotrypsinu a kaspázy-8 v nejnižších detekovatelných koncentracích 0,5 ng ml(-1), 0,2 ug ml(-1) a 2 U mL(-1), v tomto pořadí, byl aplikován a graficky znázorněn. Poté byla vyvinutá čtyřfluoroforová sonda studována také z pohledu simultánního dvouproteázového screeningu, který byl shledán jen částečně proveditelným, především kvůli neselektivnímu štěpení chymotrypsinu.
Abstrakt anglicky: A new, robust and reliable methodology for three-protease screening in a single-enzyme mode has been developed and verified, employing a multi-purpose peptide probe with three selectively cleavable sites furnished with four fluorophores. A triple-FRET-based single-excitation quadruple-emission concept for unambiguous sensing of trypsin, chymotrypsin and caspase-8 in the lowest detectable concentrations of 0.5 ng mL(-1), 0.2 mu g mL(-1), and 2 U mL(-1), respectively, has been applied and graphically depicted. Then the developed 4-dye probe has been also studied from the perspective of simultaneous two-protease screening, which was found only partially feasible, primarily due to unselective chymotrypsin cleavage.
Jazyk v originále: Angličtina
Název časopisu: RSC Advances
Rok: 2022
Svazek (ročník): 12
Číslo časopisu v rámci uvedeného svazku: 44
Strana od-do: 28780-28787
Impact factor: 3.75
Q1: ne
ISSN časopisu: 2046-2069
Vydavatel: ROYAL SOC CHEMISTRY
Způsob financování: GAČR (19-23972S)
DOI: 10.1039/d2ra05125g