Autor: Milicevic, D.; Hlavac, J.
Název práce v češtině: Detekce tří modelových proteas za pomoci imobilizovaných fluorescenčních sond
Název práce v angličtině: Fluorescence-Based On-Resin Detection of ThreeModel Proteases
Studentská publikace: ne
Klíčová slova v češtině: syntéza na pevné fáze, imobilizované sondy, modelový systém, proteasy, fluorescence, fluorofory
Klíčová slova v angličtině: solid-phase synthesis; immobilized probe; on-resin peptide cleavage; model system; simultaneous detection; protease; fluorophore; fluorescence
Abstrakt česky: Nový přístup k detekci na pryskyřici tří modelových proteáz (trypsin, chymotrypsin, a trombin) byla vyvinuta, přičemž současně již popsána metodika pro současnou detekci dvou enzymů (trypsinu a chymotrypsinu) byla dodatečně zobecněna. Vhodné imobilizované substráty obsahující specificky štěpitelné peptidové sekvence s fluorescenčními barvivy, byly syntetizovány na pryskyřici Rink Amide PEGA nebo pryskyřici Amino PEGA
modifikovaný amidovým linkerem hlavního řetězce (BAL). Výsledné sondy navázané na pevnou matrici pak byly
dispergovány v roztoku Tris-HCl pufru (pH = 8,0) a podrobeny enzymatickému štěpení. Uvolněné
fluorofory byly sledovány měřením fluorescence.
Abstrakt anglicky: A new approach to on-resin detection of three model proteases (trypsin, chymotrypsin,
and thrombin) has been developed, while at the same time already described methodology for
simultaneous detection of two enzymes (trypsin and chymotrypsin) has been additionally generalized.
Appropriate immobilized substrates, comprising specifically cleavable peptide sequences capped
with fluorescent dyes, have been synthesized on Rink Amide PEGA resin or Amino PEGA resin
modified with backbone amide linker (BAL). Resulting solid support-bound probes were then
dispersed into Tris-HCl buffer solution (pH = 8.0) and subjected to enzymatic cleavage. Liberated
fluorophores have been tracked by fluorescence measuring. The competitive activities of studied
proteases towards the thrombin probe have been efficiently limited and controlled by employing a
Bowman-Birk inhibitor into a system.
Jazyk v originále: angličtina
Název časopisu: Chemosensors
Rok: 2021
Svazek (ročník): 9
Číslo časopisu v rámci uvedeného svazku: 12
Strana od-do: 359(1-11)
Impact factor: 3.398
Q1: ne

ISSN časopisu: 2227-9040
Vydavatel: MDPI
Způsob financování: GACR projekt: 19-23972S
DOI: 10.3390/chemosensors9120359