Autor: Béres, T.; Dragull, K.; Pospíšil, J.; Tarkowská, D.; Dančák, M.; Bíba, O.; Tarkowski, P.; Doležal, K.; Strnad, M.
Název práce v češtině: Kvantitativní analýza obsahu ingenolu u druhů Euphorbia pomocí validované metody izotopového ředění na Ultra účinné kapalinové chromatografii spojené s hmotnostní spektrometrie
Název práce v angličtině: Quantitative Analysis of Ingenol in Euphorbia species via Validated Isotope Dilution Ultra-high Performance Liquid Chromatography Tandem Mass Spectrometry
Studentská publikace: ne
Klíčová slova v češtině: ingenol; vysoce výkonná kapalinová chromatografie; hmotnostní spektrometrie; metoda ředění izotopů; Rod Euphorbia
Klíčová slova v angličtině: ingenol; ultra-high performance liquid chromatography; mass spectrometry; isotope-dilution method; Euphorbia genus
Abstrakt česky: Úvod: Různé druhy rodu Euphorbia obsahují diterpeny ingenolidního typu včetně ingenol mebutate (Ingenol-3-angelát), což je látka, nalezená v rostlinách Euphorbia peplus která indukuje buněčnou smrt. Gelová formulace tohoto léčiva byla schválena US Food and Drug Administration (FDA) a Evropskou agenturou pro léčivé přípravky (EMA) pro lokální léčbu aktinické keratózy.
Cíl: Vytvořit rychlou a spolehlivou metodu kvantifikace ingenolu v různých rostlinných extraktech.
Metodika: Methanolické extrakty 38 druhů rodu Euphorbia byly analyzovány pomocí ultra vysoce účinné kapalinové chromatografie spojenou s hmotnostní spektrometrií (UHPLC-MS / MS) po methanolýze a čištění extraktu na pevné fázi (SPE). 180-značený ingenol byl připraven a použit jako vnitřní standard pro stanovení obsahu ingenolu a validaci metody.
Výsledky: Nejvyšší koncentrace ingenolu (547 mg / kg sušiny) byla zjištěna v dolních kmenových stoncích E. myrsinites. Screening identifikuje nové zdroje ingenolu.
Závěr: Nově zavedená metoda UHPLC-MS / MS se ukazuje být vhodným nástrojem pro screening extraktů rodu Euphorbia a umožňuje identifikavi rosltinných druhů vhodných pro výrobu surového materiálu a / nebo iniciaci in vitro produkce.
Abstrakt anglicky: Introduction Various species of the Euphorbia genus contain diterpene ingenol and ingenol mebutate (ingenol-3-angelate), a substance found in the sap of the plant Euphorbia peplus and an inducer of cell death. A gel formulation of the drug has been approved by the US Food and Drug Administration (FDA) and the European Medicines Agency (EMA) for the topical treatment of actinic keratosis. Objective To develop a rapid and reliable method for quantification of ingenol in various plant extracts. Methodology Methanolic extracts of 38 species of the Euphorbia genus were analysed via ultra-high performance liquid chromatography with tandem mass spectrometry (UHPLC–MS/MS) after methanolysis and solid-phase extraction (SPE) purification. The 18O–labelled ingenol analogue was prepared and used as an internal standard for ingenol content determination and method validation. Results The highest ingenol concentration (547 mg/kg of dry weight) was found in the lower leafless stems of E. myrsinites. The screening confirms a substantial amount of ingenol in species studied previously and furthermore, reveals some new promising candidates. Conclusion The newly established UHPLC–MS/MS method shows to be an appropriate tool for screening of the Euphorbia genus for ingenol content and allows selection of species suitable for raw material production and/or in vitro culture initiation. Copyright © 2017 John Wiley & Sons, Ltd.
Jazyk v originále: anglicky
Název časopisu: Phytochem. Anal.
Rok: 2018
Svazek (ročník): 29
Číslo časopisu v rámci uvedeného svazku: 1
Strana od-do: 23-29
Q1: ne
ISSN časopisu: 1099-1565
Vydavatel: WILEY-VCH Verlag GmbH & Co. KGaA, Weinheim
Způsob financování: Czech Science Foundation (Nr. 17‐14007S), by the Ministry of Education, Youth and Sports, Czech Republic ( grant LO1204 from the National Programme of Sustainability I) as well as by an internal grant of the Palacký University (Nr. IGA_PrF_2017_013).
DOI: 10.1002/pca.2711