Katedra organické chemie » Detail publikace

Detail publikace

Autor: Plačková, L.; Oklestková, J.; Pospíšková, K.; Poláková, K.; Buček, J.; Stýskala, J.; Zatloukal, M.; Šafařík, I.; Zbořil, R.; Strnad, M.; Doležal, K.,
Název práce v češtině: Magnetická mikročásticová imunopurifikace cytokininů z kořene Arabidopsis v mikroměřítku
Název práce v angličtině: Microscale magnetic microparticle-based immunopurification of cytokinins from Arabidopsis root apex
Studentská publikace: ne
Klíčová slova v češtině: cytokininy, magnetické mikročástice, imunoafinitní separace, Arabidopsis thaliana
Klíčová slova v angličtině: cytokinins, magnetic microparticles, immunoaffinity separation, Arabidopsis thaliana, technical advance
Abstrakt česky: Cytokininy jsou klíčové rostlinné hormony, které hrají klíčovou roli v růstu a vývoji rostlin. Jejich izolace a kvantifikace je vzhledem k jejím malému výskytu v rostlinném materiálu je vždy výzvou ke zvládnutí tohoto úkolu. V této práci se podařilo v mikroměřítku vyvinout metodu jednoduché magnetická mikročásticová imunopurifikace pro selektivní isolaci cytokininů z rostlinného materiálu (méně než 0,1 mg).
Abstrakt anglicky: Cytokinins (CKs) are pivotal plant hormones that have crucial roles in plant growth and development. However, their isolation and quantification are usually challenging because of their extremely low levels in planttissues (pmol g-1 fresh weight). We have developed a simple microscale magnetic immunoaffinity-based method for selective one-step isolation of CKs from very small amounts of plant tissue (less than 0.1 mg fresh weight). The capacity of the immunosorbent and the effect of the complex plant matrix on the yield of the rapid one-step purification were tested using a wide range of CK concentrations. The total recovery range of the new microscale isolation procedure was found to be 30–80% depending on individual CKs. Immunoaffinity extraction using group-specific monoclonal CK antibodies immobilized onto magnetic microparticles was combined with a highly sensitive ultrafast mass spectrometry-based method with a detection limit close to one attomole. This combined approach allowed metabolic profiling of a wide range of naturally occurring CKs (bases, ribosides and N9-glucosides) in 1.0-mm sections of the Arabidopsis thaliana root meristematic zone. The magnetic immunoaffinity separation method was shown to be a simple and extremely fast procedure requiring minimal amounts of plant tissue.
Jazyk v originále: angličtina
Název časopisu: The Plant Journal
Rok: 2017
Svazek (ročník): 89
Číslo časopisu v rámci uvedeného svazku: 5
Strana od-do: 1065-1075
Impact factor: 5.775
Q1: ne

ISSN časopisu: 0960-7412
Vydavatel: John Wiley and Sons Ltd
Způsob financování: IGA_PrF_2016_011, LO1204, LO1305, GA14-34792S
DOI: 10.1111/tpj.13443