Mgr. Naděžda Cankařová

Projekt bude zaměřen na vypracování metodiky biotinylace biologicky aktivních 2H-indazol-N-oxidů za účelem provedení afinitní chromatografie. Některé deriváty indazolů, které byly v minulosti připraveny, se ukázaly být velice aktivní na některých nádorových liniích (zejména na karcinomu tlustého střeva a chronické myeloidní leukémii rezistentní na paklitaxel). Molekulární cíl jejich působení však není absolutně znám. Jednou z možností jeho určení je právě provedení afinitní chromatografie. Za tímto účelem budou 2H-indazol-N-oxidy modifikovány polyethylenglykolovým (PEG) linkerem, na který se bude vázat biotin. Jelikož doposud není znám farmakofor 2H-indazol-N-oxidů, bude potřeba PEG linker postupně navázat na různá místa indazolu (polohy 2 a 6), aby biologicky účinná část molekuly zůstala volná pro interakci s danými proteiny. Dalším naším cílem bude příprava PEG linkeru různé délky, protože jeho optimální délka zatím není známa. Projekt bude dále zaměřen na vyvinutí univerzální metody pro modifikaci různých aminů či alkoholů PEG řetězcem a posléze biotinem. Cílem bude syntéza univerzálního kitu pro imobilizace biologicky aktivních amino- a hydroxyderivátů. Tyto kity by měly poskytnout jednoduchou možnost biotinylace používanou v laboratořích molekulární biologie.